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小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物培養(yǎng)

小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物培養(yǎng)

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小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物培養(yǎng)現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明!

小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物培養(yǎng) 詳細資料

小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives】
  小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物培養(yǎng)小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物是從小鼠小腸粘膜上皮細胞提取的,小鼠小腸粘膜上皮細胞從正常小鼠小腸粘膜組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。        cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及0mgRNA68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運輸cDNA μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。        蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。        潛在的應(yīng)用: <>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達圖譜

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小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物培養(yǎng)

Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives

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注意事項:
. 接收到小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物培養(yǎng),肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟:
小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物培養(yǎng)對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

Galectin-3 / LGALS3 抗體, 兔單抗 FCM   IF   ICC/IF   50 µg

MAPD 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

RCAN 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg

FOXA 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg

CD46 / MCAM 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

CD33 / Siglec-3 抗體 (PerCP), 鼠單抗 FCM    25 Test

SIGIRR / TIR8 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

SECTM 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 µg

JAM-A / FR 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

FAS / CD95 / APO- / TNFRSF6 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µL

小鼠小腸粘膜上皮細胞提取物培養(yǎng)Matrine 59-02-8  20mg

Tween-20 吐溫-20 00ml  瓶

無菌去離子水 For Cell Culture 500ml  瓶

Purine Nucleoside Phosphorylase 嘌呤核苷磷酸化酶 500U  瓶

伊紅染液 500ml  瓶

芬蘭彩色移液器 5-50ul  支

RNAwait(非凍型組織RNA保存液) 0ml  瓶

Pyruvic Acid 丙酮酸鈉 25g  瓶

人外周血淋巴細胞分離液(FICOLL配制) 200ml  瓶

Liquid Sabourand Medium 液體沙氏培養(yǎng)基 250g  瓶

50ml親和層析柱 (2.5×6) 50ml  個 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小鼠小腸粘膜上皮 Mouse Intestine: Nor
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