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小鼠腎小管組織提取物費(fèi)用

小鼠腎小管組織提取物費(fèi)用

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小鼠腎小管組織提取物費(fèi)用 詳細(xì)資料

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小鼠腎小管組織提取物費(fèi)用

Tubular: Normal Mouse Tubular Derivatives

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小鼠腎小管組織提取物【Tubular: Normal Mouse Tubular Derivatives】
     小鼠腎小管組織提取物費(fèi)用腎小管是與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長(zhǎng)上皮性小管,具有重吸收和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu),分布位置和功能分成三部分:近端小管,細(xì)段和遠(yuǎn)端小管。腎小管在腎髓質(zhì)中。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍小鼠腎小管組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的*條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。        cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA*鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及0mgRNA。68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。        蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。        潛在的應(yīng)用: <>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。
培養(yǎng)步驟:
小鼠腎小管組織提取物費(fèi)用對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

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小鼠腎小管組織提取物費(fèi)用HP-20大孔吸附樹(shù)脂 500g  瓶

(±)-Terpinen-4-ol 4-松油烯醇 562-74-3  0.5mL

24孔培養(yǎng)板 00塊/箱  塊

暗盒 5×7  盒

20×DAB顯色液 A液和B液各0ml 0ml  盒

GST標(biāo)簽純化樹(shù)脂(50%漿料) 0ml  瓶

化丙錠PI溶液(mg/ml) 0×ml  套

聚四乙烯磁力攪拌子C-20 個(gè)  個(gè)

檸檬酸鈉緩沖液0.0mol-L, pH6.0 L  袋

Ajugol 益母草苷 52949-83-4  20mg

MarkerⅡDNA ladder 00T  支

注意事項(xiàng):
. 接收到小鼠腎小管組織提取物費(fèi)用,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

 

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